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色譜工作者常會(huì)碰到這樣的問題，什么時(shí)候該換色譜柱了?色譜柱的塔板數(shù)能體現(xiàn)色譜柱的狀態(tài)嗎?確定表明一支色譜柱應(yīng)該“退休”的標(biāo)準(zhǔn)，從經(jīng)驗(yàn)來看，當(dāng)一支色譜柱的塔板數(shù)降低到新柱子時(shí)的百分之多少時(shí)就可以認(rèn)為該色譜柱不能再使用了呢?只看塔板數(shù)作為評(píng)價(jià)色譜柱質(zhì)量的指標(biāo)合適嗎?在您的實(shí)驗(yàn)室里是如何判斷一根色譜柱不可以再用了呢?塔板數(shù)是一個(gè)粗略的指標(biāo)，不能作為評(píng)價(jià)色譜柱的標(biāo)準(zhǔn)。通常使用塔板數(shù)來考察色譜系統(tǒng)：將新柱子接到儀器上，根據(jù)色譜柱生產(chǎn)商提供的測(cè)試條件測(cè)試該色譜柱，你應(yīng)該得到和分析報(bào)告上同...

一、峰丟失可能的原因及應(yīng)采用的排除方法1.注射器有毛病，用新注射器驗(yàn)證。2.未接入檢測(cè)器，或檢測(cè)器不起作用，檢查設(shè)定值3.進(jìn)樣溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調(diào)整4.柱箱溫度太低，檢查溫度，并根據(jù)需要調(diào)整5.無載氣流，檢查壓力調(diào)節(jié)器，并檢查泄漏，驗(yàn)證柱進(jìn)品流速6.柱斷裂，如果柱斷裂是在柱進(jìn)口端或檢測(cè)器末端，是可以補(bǔ)救的，切去柱斷裂部分，重新安裝二、前沿峰1.柱超載，減少進(jìn)樣量2.兩個(gè)化合物共洗脫，提高靈敏度和減少進(jìn)樣量，使溫度降低10~20度，以使峰分開3.樣品冷凝，檢查進(jìn)樣口...

先說說柱子能不能反沖的問題，色譜柱到底能不能反沖?如果色譜柱兩端的篩板孔徑相同反沖是不會(huì)有什么問題的，從填料流失的角度來說，粒徑為5um，而篩板孔徑為2um，這種情況下正沖反沖都不會(huì)造成填料的流失;此外，從柱子裝填的角度來說，裝柱時(shí)是按照與柱身箭頭相反的方向裝填的，與反沖時(shí)的液體流路方向相同，裝柱時(shí)那么高的壓力(通常大于40MPa)下用頂替液沖刷都沒有問題，難道區(qū)區(qū)1ml/min流速下的十幾個(gè)MPa會(huì)造成柱床松動(dòng)?更何況反沖時(shí)通常用的要么是90%水、要么是90%或純的有機(jī)相，...

在色譜分析域中，允許實(shí)驗(yàn)室出于提高檢測(cè)性能與效率的需要，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)方法或方法中規(guī)定的儀器操作條件進(jìn)行調(diào)整，但不能超出一定的規(guī)定。超出一定的調(diào)整都視為方法變動(dòng)。1、HPLC流動(dòng)相的pH值流動(dòng)相制備過程中，水溶性緩沖液pH值可在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定值的±0.2pH單位范圍內(nèi)調(diào)整。2、HPLC緩沖液中鹽的濃度流動(dòng)相制備過程中，如果pH值變化滿足要求，則水溶性緩沖液中鹽濃度可在±10%范圍內(nèi)調(diào)整。3、HPLC流動(dòng)相中各組分的比例流動(dòng)相中組分的增減可以達(dá)到該組分在組成中所占...

高效液相色譜系統(tǒng)一般由高壓輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、數(shù)據(jù)記錄及處理裝置等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測(cè)器是關(guān)鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、預(yù)柱或保護(hù)柱、柱溫控制器等。一、高壓輸液泵泵的種類很多，按輸液性質(zhì)可分為恒壓泵和恒流泵；恒流泵按結(jié)構(gòu)又可分為螺旋注射泵、柱塞往復(fù)泵和隔膜往復(fù)泵。恒壓泵受柱阻影響，流量不穩(wěn)定；螺旋泵缸體太大，這兩種泵已被淘汰。目前應(yīng)用最多的是柱塞往復(fù)泵。二、進(jìn)樣器高效液相色譜早期使用隔膜和停流進(jìn)樣器，裝在色譜柱入口處。現(xiàn)在大...

氨基柱既可以正相使用，也可以反相使用，但是要注意到的是：正相溶劑和反相溶劑往往是不互溶的，正常情況新氨基柱保存在正相環(huán)境中，例如LUNA氨基柱保存在正己烷-乙腈（99：1）中，但也有例外，像安捷倫的氨基柱保長(zhǎng)期保存要保存在純乙腈中，具體哪個(gè)廠家的柱子的保存方法要看柱子的說明書，根據(jù)要求來保存。說一下氨基柱的使用注意事項(xiàng)。1.正相使用1.1新柱子可直接用流動(dòng)相。推薦先用正己烷-乙腈（99：1）以0.5ml/min的流速?zèng)_10倍柱體積，再根據(jù)流動(dòng)相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相...

1.流動(dòng)相溶劑應(yīng)選擇HPLC的溶劑或依此為標(biāo)準(zhǔn)的溶劑。流動(dòng)相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣，清除微粒和灰塵。在送液泵內(nèi)，為了防止雜物（固體）進(jìn)入流路，裝有吸濾器，但網(wǎng)孔徑為10μm，比此更小的顆粒仍然可通過，這會(huì)導(dǎo)致流路和柱子堵塞和污染。為此，建議常用0.45μm濾膜過濾。流動(dòng)相溶劑須經(jīng)脫氣，如不脫氣，在溶劑混合時(shí)，或壓力溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生大量氣泡，會(huì)導(dǎo)致泵誤動(dòng)作和輸液不暢，檢測(cè)器產(chǎn)生噪聲信號(hào)等。2.流動(dòng)相恢復(fù)到室溫后使用。流動(dòng)相溫度與室溫相差時(shí)，流動(dòng)相在恢復(fù)到室溫前，基...